Nat Commun丨刘真研究组开发通用高效的哺乳动物基因敲入策略

主要观点总结

文章介绍了中国科学院脑智卓越创新中心刘真团队开发的适用于哺乳动物胚胎基因敲入的ChemiCATI策略，该策略实现了高效、可预测的哺乳动物胚胎基因组精准编辑，为动物模型的建立和胚胎发育研究提供了重要技术支撑。文章详细阐述了CRISPR/Cas9系统的工作原理以及基因敲入过程中面临的挑战，介绍了团队开发的ChemiCATI策略的原理和应用，以及其在不同基因位点和不同sgRNA类型中的通用性和高效性。此外，文章还涉及该研究的合作机构和作者的相关信息。

关键观点总结

关键观点1: CRISPR/Cas9系统在哺乳动物胚胎基因敲入中的挑战

CRISPR/Cas9系统通过诱导DNA双链断裂进行修复，但HDR通路在哺乳动物胚胎中发生概率低，制约了高效敲入策略的建立。

关键观点2: ChemiCATI策略的开发和应用

刘真团队开发出了一种适用于不同基因位点、敲入效率最高可达90%的CRISPR通用敲入策略——ChemiCATI，实现了高效、可预测的哺乳动物胚胎基因组精准编辑。

关键观点3: ChemiCATI策略的原理

团队通过小分子化合物筛选来调控DNA的断裂损伤修复通路，利用DNA依赖性蛋白激酶催化亚基（DNA-PKcs）抑制剂AZD7648来重塑sgRNA的修复途径偏好，从而提升基因敲入效率。

关键观点4: 研究的重要性和应用前景

该研究不仅克服了传统敲入方法对高效sgRNA的依赖，还极大拓宽了基因编辑在临床疾病模型构建与治疗中的应用空间。

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