如何防止WB实验的蛋白样本降解

主要观点总结

这篇文章主要讨论了WB（Western Blot）实验中蛋白样本降解的问题，描述了如何避免样本在上样前发生降解。文章指出，蛋白样本降解在实验结果中的体现，以及防止降解的操作要点。

关键观点总结

关键观点1: 蛋白样本降解的表现

蛋白样本降解在WB实验结果中表现为主要条带消失，出现一系列小分子量条带，条带模糊、弥散、拖尾等。这种降解的典型信号是条带分子量变小。

关键观点2: 样本降解的原因及预防措施

样品中的蛋白酶和磷酸酶会快速降解蛋白，因此需加入酶抑制剂防止降解。避免降解的操作要点包括：提好蛋白后立即加入上样缓冲液并尽快进行实验，确保全程低温、冰上操作，正确加入新鲜的蛋白酶和磷酸酶抑制剂。

关键观点3: 重点总结

防止WB样本降解的关键是冰上操作以延缓降解，提好的蛋白现提现用避免久放，正确加入蛋白酶抑制剂。记住，再好的抗体也救不回已经降解的蛋白。